2021年11月5日，徠卡顯微成像用戶會在美麗的鵬城——深圳與大家如約而至，這也是我們第一次為一個城市的用戶舉辦成像技術(shù)交流會，當(dāng)天，80余位專家、青年學(xué)者、研究人員參加了本次會議。由此可見近些年來深圳這座年輕的城市在科研單位建設(shè)上的突飛猛進(jìn)，也能看出當(dāng)?shù)氐目蒲泄ぷ髡邆儞肀录夹g(shù)的熱情。
會上諸多Leica的資深用戶分享了自己的研究成果與心得體會，我們一起來回顧下吧。
講題一：FLIM技術(shù)在生命科學(xué)研究中的應(yīng)用
講者：南方科技大學(xué) 魏聞捷 高級工程師

本次徠卡顯微成像技術(shù)交流會交流環(huán)節(jié)的開場報告由南方科技大學(xué)分析測試中心的魏聞捷老師帶來，報告題目為“FLIM技術(shù)在生命科學(xué)研究中的應(yīng)用”。本次報告中，魏老師不僅向我們清晰地講解了什么是熒光壽命，如何在時域和頻域上測量熒光壽命，如何利用不可見的熒光壽命進(jìn)行成像（FLIM），還分析了使用徠卡顯微鏡進(jìn)行實驗得到的FLIM數(shù)據(jù)，充分證明了FLIM在可以得到除了光譜信息之外的時間維度上的更多信息。隨后魏老師引用了徠卡顯微鏡的實驗數(shù)據(jù)，介紹了FLIM在生命科學(xué)研究中的應(yīng)用，內(nèi)容包括FLIM-FRET在代謝組學(xué)研究中的優(yōu)勢：可拍攝到光鏡下很難拍攝到的過程（如病毒侵染過程）；可進(jìn)行瞬間/長時間的動態(tài)捕捉，定量精確，可重復(fù)性好，操作簡便；FLIM可利用自發(fā)熒光物質(zhì)作為生物傳感器進(jìn)行微環(huán)境的探測；FLIM可進(jìn)行時間維度的熒光拆分等。除此以外魏老師介紹了常用的FLIM分析軟件和APP，并對徠卡的FLIM模塊給予了高度評價。魏老師坦言，徠卡的FLIM模塊已經(jīng)整合進(jìn)入徠卡共聚焦軟件，作為入門級的操作者，只要會使用徠卡共聚焦顯微鏡，就可以在進(jìn)行高質(zhì)量成像的過程中輕易獲取到FLIM數(shù)據(jù)，對用戶非常友好。徠卡顯微鏡的成像質(zhì)量配合功能強(qiáng)大的FLIM功能，將會為生物科研工作者提供強(qiáng)有力的支持。

講題二：白激光在材料科學(xué)中的應(yīng)用
講者：香港科技大學(xué) 何威

何老師在報告中提到，熒光在生活中無處不在，不同發(fā)光材料需要的激發(fā)光不同，常規(guī)可選激光譜線：405、488、514、561、633nm適用于生命科學(xué)，但不太能滿足發(fā)光材料科學(xué)的研究，往往無法達(dá)到最佳的激發(fā)效率，可能錯失細(xì)胞成像中一些有趣的現(xiàn)象。而徠卡白激光可實現(xiàn)1nm的步距連續(xù)調(diào)節(jié)激發(fā)光波長，助力于解決新開發(fā)的熒光材料成像問題。
何老師實驗室研究的新型熒光染料AIEgens（聚集誘導(dǎo)發(fā)光分子）可覆蓋整個可見光波段，乃至紫外和紅外，這就需要特別適合的激發(fā)光來進(jìn)行生物成像，徠卡最新推出的STELLARIS 8白激光從440到790nm連續(xù)可調(diào)，可讓發(fā)光材料的骨架設(shè)計更加靈活，并且白激光為脈沖激光，可實現(xiàn)熒光壽命維度成像。另外最新研究的激發(fā)光依賴性的簇發(fā)光材料，通過波長步長可調(diào)的激發(fā)光光源照射會發(fā)射出不同波長的光，對于新材料在生物成像中的探索和應(yīng)用起到了推動作用。
講題三：FLIM在生命科學(xué)及材料科學(xué)中的應(yīng)用
講者：中國科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院 張鵬飛 副研究員

本次報告中，張鵬飛首先講解了新型熒光材料的優(yōu)勢（抗漂白能力強(qiáng)、Stokes位移大等），隨后向我們介紹了他所帶領(lǐng)的研究團(tuán)隊一路走來所開發(fā)的熒光材料（包括近紅外量子點、AIE染料等）及其應(yīng)用，還和我們分享了他們團(tuán)隊熒光材料開發(fā)的成果及寶貴經(jīng)驗。將FLIM技術(shù)和新型近紅外量子點“強(qiáng)強(qiáng)聯(lián)合”后，張老師的團(tuán)隊實現(xiàn)了通過將熒光壽命及強(qiáng)度進(jìn)行二維結(jié)合，進(jìn)一步實現(xiàn)了提高近紅外熒光材料的分辨能力、長時間活細(xì)胞成像、活體微環(huán)境實時監(jiān)測等多項技術(shù)突破；通過STED技術(shù)與AIE材料的“兄弟合力”，張老師成功對活細(xì)胞骨架、活細(xì)胞的線粒體、溶酶體以及活體的腫瘤組織進(jìn)行了長時間的成像。張老師在2012年發(fā)表的JACS中使用了徠卡SP5共聚焦顯微鏡，成功對病毒侵染細(xì)胞的過程進(jìn)行了成像，他認(rèn)為，徠卡的FLIM和STED成像技術(shù)可以對熒光材料的開發(fā)及應(yīng)用方面發(fā)揮巨大作用，如今隨著徠卡STED和FLIM技術(shù)水平的不斷提升，該類設(shè)備會有更多的應(yīng)用場景。
講題四：活細(xì)胞線粒體STED超分辨成像研究
講者：深圳大學(xué) 楊志剛 副教授

最后一位為大家?guī)韺嶒灧窒淼氖巧钲诖髮W(xué)物理與光電工程學(xué)院的楊志剛老師，他介紹到線粒體內(nèi)膜結(jié)構(gòu)及動態(tài)變化研究可以預(yù)測免疫T細(xì)胞的免疫記憶能力，并且分裂線粒體的命運預(yù)測，為線粒體相關(guān)疾病的早期診斷與干預(yù)提供有效手段，而要研究這些，就涉及到超分辨成像。楊老師課題組利用熒光探針進(jìn)行活細(xì)胞超分辨成像及結(jié)構(gòu)測量研究，而綜合成像分辨率和成像速度，STED超分辨成像具有顯著優(yōu)勢。STED成像效果受到熒光探針性能好壞的影響，想要獲得更高的分辨率，需要開發(fā)具有低損耗激光功率的新型熒光探針，楊老師實驗室對此展開了以下三個方面的研究：
1.活細(xì)胞線粒體膜鄰位二巰基蛋白質(zhì)共價標(biāo)記
2.低功率損耗激光（紅色、綠色活細(xì)胞長時程超分辨成像）
3.低功率單束激發(fā)光、單束損耗激光實現(xiàn)雙色或多色STED成像
最終開發(fā)了一種具有超低飽和損耗激光功率的新型方酸菁染料STED探針，用于活細(xì)胞線粒體長時程動態(tài)變化超分辨成像及結(jié)構(gòu)測量，為線粒體功能研究提供新的手段，并致力于設(shè)計優(yōu)化新型超分辨探針，進(jìn)行同步多色STED成像，解決具體生物學(xué)問題。
除了各位用戶們精彩的科研分享，來自徠卡的各位應(yīng)用專家們也向客戶們介紹了一些前沿技術(shù)，重新定義共聚焦的STELLARIS，融合了超分辨和熒光壽命的TauSTED，多光子活體成像新技術(shù)DIVE和多功能AI圖像分析軟件AIVIA。學(xué)術(shù)交流之后，各位參會者還積極的參加了現(xiàn)場的演示環(huán)節(jié)，從寬場到共聚焦，從硬件到軟件，大家紛紛表示，不斷推出的新產(chǎn)品，對于科研的促進(jìn)作用是顯而易見，只是一天時間太短，不能充分的體會和感受。好消息是我們的樣機(jī)會在深圳停留一段時間，如果有興趣進(jìn)一步了解，請聯(lián)系當(dāng)?shù)氐膹瓶üぷ魅藛T吧，也期待我們來年再會。

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