細胞分子生物學的關鍵是制備用于生物大分子和生化學分析的細胞。在進行復雜的分子雜交等分子生物學研究中,由于非目的細胞的污染而嚴重影響了實驗結果。從新鮮組織獲得的細胞進行培養(yǎng),雖可減少污染,但由于培養(yǎng)環(huán)境不同于組織自然生長狀態(tài),培養(yǎng)細胞并不能反映它們原生的基因表達方式和分子事件。激光顯微切割技術是為了從多種細胞構成的組織中獲得純一細胞而逐漸發(fā)展起來的。它是20世紀90年代后期,由現(xiàn)代物理學和生物學相結合的精確取材技術。激光顯微切割技術(Laser Microdissection,LMD)是一項借助激光顯微切割儀,在顯微鏡下從組織切片或涂片中分離、純化單一類型細胞群體或單個細胞的技術,具有快速、準確且操作簡便的特點,該技術成功地解決了大塊分離組織中的細胞功能異質(zhì)性問題
11月24日15:00,徠卡顯微系統(tǒng)聯(lián)合丁香園舉辦「激光顯微切割技術與組織區(qū)組學研究」線上分享,邀請到徠卡生命科學顯微鏡高級應用專家高天龍向大家介紹這項技術的原理、特性和在多個領域的應用情況。掃碼即可免費預約報名!直播結束后,我們會安排發(fā)送本次直播的相關資料。
TIPS
激光顯微切割的應用領域非常廣泛,主要用于醫(yī)院病理科、腫瘤研究、疾病病理研究、植物學、細胞生物學、中藥研究、法醫(yī)鑒定等領域。
1、 腫瘤研究:主要通過常規(guī)染色或是熒光染色,以石蠟或冰凍切片的方式制備,通過形態(tài)學特異性的獲取腫瘤組織,制備高度單一的腫瘤樣品,后期提取DNA、RNA、蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì),分別分析如基因突變(測序)、基因的表達譜(熒光定量)蛋白標志物(2D電泳、質(zhì)譜、蛋白測序等)。
2、 病理研究:主要通過常規(guī)染色或是熒光染色,以石蠟或冰凍切片的方式制備,通過形態(tài)學特異性的獲取特定組織或細胞,分析特定組織類型的基因表達等。如腦片的海馬與皮層研究、糖尿病的病理研究、疾病的病理研究、還有一些病理診斷等。
3、 細胞生物學:特定的轉(zhuǎn)基因動物或轉(zhuǎn)基因細胞,通過熒光蛋白,特異性的識別轉(zhuǎn)基因陽性的細胞,特定獲取進行分析。
4、 植物學:利用很多植物組織有自發(fā)熒光的特性,不同的組織的自發(fā)熒光不同,分析特定組織類型的基因表達或蛋白、特定活性物質(zhì)的表達。主要應用于植物病理以及生理病理機制方面的研究,如白云杉的防御機制研究、水稻共生菌研究、柑橘病理過程研究、植物染色體研究等等。
5、 法醫(yī)學:獲取體液標本,通過細胞涂片的方式,特異性的常規(guī)染色,特定的獲取細胞、血細胞、上皮細胞等進行DNA指紋的比對。
6、 活細胞研究:通過特定的帶膜培養(yǎng)皿,特異性的分離單細胞或細胞克隆,獲取后的細胞可以進行進一步的后續(xù)培養(yǎng)或直接分析。
7、 中藥學研究:通過激光顯微切割聯(lián)合液質(zhì)聯(lián)用進行中藥質(zhì)量的評價或特定組織生物活性物質(zhì)的評價。評價特定組織類型的基因表達。
染色體研究:利用激光顯微切割獲取單條的染色體,分析單條染色體上的基因定位或單條染色體測序等。
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