激光共聚焦顯微鏡(LaserScanningConfocalMicroscope簡稱LSCM)是以激光作為激發(fā)光源,采用光源針孔與檢測針孔共軛聚焦技術(shù),對樣本進行斷層掃描,以獲得高分辨率光學切片的熒光顯微鏡系統(tǒng),并帶有一套對其所觀察到的對象進行數(shù)字圖像分析處理的系統(tǒng)軟件。
激光共聚焦顯微鏡(LSCM)屬于細胞生物領(lǐng)域的新型儀器,在醫(yī)學基礎(chǔ)研究中應用于多重熒光影像、3D立體影像重建、3D動態(tài)影像獲取與分析、神經(jīng)立體分布影像、形態(tài)與動態(tài)分析、次微米單晶熒光影像技術(shù)、多重熒光蛋白影像技術(shù)、熒光共振能量轉(zhuǎn)移、細胞離子流定量分析、長時間影像記錄、Z軸掃描與測量、基因影像分析、染色體多重熒光原色表現(xiàn)、活體胚胎研究、穿透光影像/反射光影像、材料表面分析、材料顯微硬度分析、晶園分析及薄膜分析。簡而言之,只要目的結(jié)構(gòu)是用熒光探針標記的,都可用激光共聚焦顯微鏡觀察。
激光共聚焦顯微鏡在以下研究領(lǐng)域中應用較為廣泛:
1、細胞生物學:如:細胞結(jié)構(gòu)、細胞骨架、細胞膜結(jié)構(gòu)、流動性、受體、細胞器結(jié)構(gòu)和分布變化、細胞凋亡機制;各種細胞器、結(jié)構(gòu)性蛋白、DNA、RNA、酶和受體分子等細胞特異性結(jié)構(gòu)的含量、組分及分布進行定量分析;DNA、RNA含量、利用特定的抗體對紫外線引起的DNA損傷進行觀察和定量;分析正常細胞和癌細胞細胞骨架與核改變之間的關(guān)系;細胞黏附行為等
2、生物化學:如:酶、核酸、受體分析、熒光原位雜交、雜色體基因定位等,利用共聚焦技術(shù)可以取代傳統(tǒng)的核酸印跡染交等技術(shù),進行基因的表達檢測,使基因的轉(zhuǎn)錄、翻譯等檢測變的更加簡單、準確。
3、藥理學:如:藥物對細胞的作用及其動力學;藥物進入細胞的動態(tài)過程、定位分布及定量
4、生理學、發(fā)育生物學:如:膜受體、離子通道、離子含量、分布、動態(tài);動物發(fā)育以及胚胎的形成,骨髓干細胞的分化行為;細胞膜電位的測量.熒光漂白恢復(FRAP)、熒光漂白丟失(FLIP)的測量等。
5、遺傳學和組胚學:如:細胞生長、分化、成熟變化、細胞的三維結(jié)構(gòu)、染色體分析、基因表達、基因診斷。